1、细胞悬浮反复冻融3次,3000rpm离心15min,取上清液500ul。2、500ul样品中加入3ul1.5MTris-Cl,20ul 0.5mol/mlEDTA和5.2u1 Np-40。3、加入终浓度为50ug阅读全文
异硫氰酸胍法 取1 g叶片,液氮下充分研磨,迅速转移至离心管,加入3 mL 异硫氰酸胍提取液(4M异硫氰酸胍、2.5 M柠檬酸钠,pH7.0,0.5 %十二烷基肌氨酸钠,0.1 M巯基乙醇) 混匀。再依次加入0.3 mL 2 M NaAc 阅读全文
方法一:1.取两片幼嫩新鲜叶片,置于预冷的研钵中,倒入适量液氮,迅速研磨成粉末状,随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50ul抗氧化剂2-巯基乙醇,继续研磨成略有流动性的糊状或粥状,转入1.5ml的离心管中,于65℃水浴锅中保温约6阅读全文
1. 组织块解冻,取适量组织于PBS溶液中清洗干净后放入装有500微升PBS的离心管中(1.5ml),用剪刀剪碎;12000rpm离心8min,取出弃上清;2. 加入0.45ml TES混匀,再加入50ul SDS(10%),20ul蛋白酶阅读全文
1、低熔点琼脂糖挖块法:在琼脂糖主链导入羟乙基修饰后,其凝固点温度降为30度,熔化温度为65度,这一温度低于绝大多数双链DNA的变性温度,利用这类凝胶纯度高熔点低的特点,在水平式琼脂糖凝胶电泳上,使所需的目的DNA片段转移到低熔点琼脂糖凝胶阅读全文
直接法提取DNA直接法提取DNA的步骤如下:1)取1g土样,倒入灭菌的50mL离心管中2)加入10mLTENPP缓冲液(20&nbs阅读全文
方法一:1.将冰冻的血在室温下溶化;2.取1ml血液转入一无菌的2ml离心管中,加入等体积的PBS磷酸盐缓冲液,充分混匀后12000rpm离心5min,弃上清;3.加入667μl STE,24μl的20%的SDS,37℃水浴1h;4.加10阅读全文
方法一:改良TES水浴法将蜡块组织切片为10μm大小,修剪掉多余的石蜡,取10片置于1.5ml Eppendorf 管中,加入1ml TES溶液充分振荡10min,70℃水浴30min,15000r/min 离心15min,弃上清,重复2次阅读全文
方法一:石英砂法1、5000rpm×5min 收集过夜培养的菌体(5ml左右),于 200μL 裂解液(50 mmol/ L Tris-HCl pH 8.0 , 180 mmol/ LEDTA pH 8.0 , 1 % SDS , 现配)中阅读全文
一、异硫氰酸胍提取法1、取200μl样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌Eppendorf管;2、加600μl异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200μl氯仿,颠倒混匀;3、13000rpm离心15min;阅读全文