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真菌菌丝PCR
一、实验目的：
通过不同的方法处理真菌菌丝并进行PCR，看是否能扩出条带。
实验设备与材料
快速DNA提取检测试剂盒（simgen）、
2×Taq Plus PCR Master Mix（simgen）、
水浴锅（XMTD-6000，上海宜昌仪器纱筛厂）、
离心机（5452，德国eppendorf股份公司）、
PCR仪（A-80343,Progene）、
漩涡振荡仪（XH-C，金坛市医疗仪器厂）。
二、实验方法及步骤：
方法1：使用快速DNA提取检测试剂盒
取真菌菌丝与洁净的1.5ml离心管，加100μl裂解液，用研磨棒将菌丝研磨破碎，再加10μl蛋白酶K混匀，56℃水浴10min，95℃水浴5min（由于蛋白酶K会消化Taq酶，所以要使蛋白酶K失活，以免Taq酶被消化），取75μl 上清作为PCR模板待用。
配置PCR扩增体系，加1/10体积模板进行PCR扩增
组成成分 | 使用量 |
2×Taq Plus PCR Master Mix | 20 μl |
Primer 正向（10 μM） | 1μl |
Primer 反向（10 μM） | 1μl |
ddH2O | 14μl |
模板 | 4μl |
方法2：直接PCR
配置PCR扩增体系，将菌丝直接加入体系中进行PCR扩增
组成成分 | 使用量 |
2×Taq Plus PCR Master Mix | 20 μl |
Primer 正向（10 μM） | 1μl |
Primer 反向（10 μM） | 1μl |
ddH2O | 18μl |
模板 | 菌丝 |
扩增程序：
扩增产物4℃保存。
取PCR产物进行电泳
三、实验结果：
