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真菌菌丝PCR
一、实验目的：
通过不同的方法处理真菌菌丝并进行PCR，看是否能扩出条带。
实验设备与材料
快速DNA提取检测试剂盒（simgen）、
2×Taq Plus PCR Master Mix（simgen）、
水浴锅（XMTD-6000，上海宜昌仪器纱筛厂）、
离心机（5452，德国eppendorf股份公司）、
PCR仪（A-80343,Progene）、
漩涡振荡仪（XH-C，金坛市医疗仪器厂）。
二、实验方法及步骤：
方法1：使用快速DNA提取检测试剂盒
取真菌菌丝与洁净的1.5ml离心管，加100μl裂解液，用研磨棒将菌丝研磨破碎，再加10μl蛋白酶K混匀，56℃水浴10min，95℃水浴5min（由于蛋白酶K会消化Taq酶，所以要使蛋白酶K失活，以免Taq酶被消化），取75μl 上清作为PCR模板待用。
配置PCR扩增体系，加1/10体积模板进行PCR扩增
方法2：直接PCR
配置PCR扩增体系，将菌丝直接加入体系中进行PCR扩增
扩增程序：
扩增产物4℃保存。
取PCR产物进行电泳
三、实验结果：
·产品中添加的Taq酶抗体、PCR增强剂和蛋白稳定剂协同提高了PCR效率和灵敏度·Taq和Pfu酶协同作用，既兼顾了扩增产物的高保真性，又保证了扩增片段的长度，可以从基因组DNA中扩增出长达4kb的片段或者从λDNA中扩增出长达5kb的片段 查看产品
·提取过程无需液氮研磨、无需有机溶剂抽提，无需无水乙醇沉淀，简便、快捷，并且质量稳定可靠 ·优化的2× PCR Mix包容性强，在少量PCR抑制物存在的情况下仍能进行高效特异扩增·灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点，特别适合于高通量的筛选·&n 查看产品