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培养细胞总RNA试剂盒实验案例

作者:新景实验室
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一、实验目的:

检测Simgen 培养细胞总RNA试剂盒提取不同培养细胞中的RNA的效果。

二、实验步骤:

使用Simgen 培养细胞总RNA试剂盒分别提取 HL-60HEK239 K562 

SGC-7901等细胞的RNA(具体实验步骤详见说明书)。

三、实验样本:

2×106HL-60细胞、2×106HEK239细胞、2×106 K562细胞、2×106 SGC-7901细胞。

四、实验结果:

1.使用Simgen 培养细胞总RNA试剂盒提取的上述各细胞中的RNA电泳图:

 

Mλ-EcoT14 I digest
泳道1:用Simgen培养细胞总RNA试剂盒从2×106  HL-60细胞中分离纯化的RNA
泳道2:用Simgen培养细胞总RNA试剂盒从2×106 HEK239细胞中分离纯化的RNA
泳道3:用Simgen培养细胞总RNA试剂盒从2×106 K562细胞中分离纯化的RNA
泳道4:用Simgen培养细胞总RNA试剂盒从2×106  SGC-7901细胞中分离纯化的RNA

2.使用Simgen 培养细胞总RNA试剂盒提取的上述各细胞中的RNA进行反转录后,再扩增的曲线图:

 

Simgen培养细胞总RNA试剂盒HL-60HEK239 K562 SGC-7901(分别是1-4中提取的RNASimgen cDNA第一链合成试剂盒处理后,用Human β-actin引物进行荧光定量PCR扩增的曲线

五、实验结论:

1. 根据上图电泳图可知,使用Simgen 培养细胞总RNA试剂盒提取的培养细胞的RNA,条带清晰明显。

2.根据扩增曲线图可知,提取的各细胞RNA经反转录后成功扩增出曲线,证明Simgen 培养细胞总RNA试剂盒提取的RNA能够满足后续实验需求。