一、实验目的:
比较Simgen血浆游离核酸纯化试剂盒和传统煮沸法提取核酸的效果.
二、实验方法:
1.使用Simgen血浆游离核酸纯化试剂盒提核酸(实验步骤详见说明书)
2. 使用传统煮沸法提核酸
3. 将所得核酸分别进行扩增
三、实验样本:
将SRY基因(男性特征基因)扩增产物用人血浆稀释到10 copies/ml后作为样本。
四、实验结果:
曲线1是Simgen血浆游离核酸纯化试剂盒提取的核酸5 μl作为模板检测SRY基因的效果。
曲线2是Simgen血浆游离核酸纯化试剂盒提取的 核酸20 μl作为模板检测SRY基因的效果。
曲线3是煮沸法提取的核酸5 μl作为模板检测SRY基因的效果。
五、实验结论:
1. 根据曲线1和2可知,加大DNA模板量,CT值变小,说明Simgen血浆游离核酸纯化试剂盒提取的DNA纯度较高,不含杂质和PCR抑制物。
2. 根据曲线1和3分析,针对核酸含量少的血浆样本时,传统煮沸法效果极差,很难提取到有效核酸,因此扩增结果显示为阴性,而Simgen血浆游离核酸纯化试剂盒却能很好解决这一难题,提取到大量有效核酸。