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一、异硫氰酸胍提取法
1、取200μl样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml 灭菌Eppendorf 管；
2、加600μl异硫氰酸胍，然后加入对照和样品，再加200μl氯仿，颠倒混匀；
3、13000rpm离心15min；
4、在第3步离心快结束时，另取同样多Eppendorf 管，加入400μl 于 -20℃预冷的异丙醇；
5、取第3步离心的上清（一定不要吸取到中间白色层，第3步离心结束往外拿的时候，管子尽量不要倾斜）转移到第4步准备的管中，颠倒混匀；
6、13000rpm离心15min，轻轻倒去上清，在吸水纸上尽量沾干液体；
7、加600μl 75%乙醇，颠倒数次以洗涤残存异丙醇；
8、13000rpm离心15min，轻轻倒去上清，在吸水纸上尽量沾干液体；
9、4000rpm离心10sec，将管壁残存液体甩到底部，用微量枪头吸干，室温干燥2~3min（不可过分干燥，防止下一步RNA不溶解）；
10、加入20μl DEPE水(加入DEPC的纯水高压后的水即为DEPE水)，轻轻混匀溶解RNA。2000rpm离心5sec，冰上保存备用（最好2小时内使用，以免RNA降解）。
二、Trizol LS提取法
所提取物为血清、血液、细胞培养液、鸡胚尿囊液等液体中的病毒。提取时尽量在人少时进行，防止空气中RNA酶的污染。所用一切物品也应是无RNA酶。
1、在1.5ml的Eppendorf 管中加入病毒原液500μl，再加入Trizol LS 500μl，充分混匀，室温放置10min；
2、加入200μl的氯仿，盖紧离心管盖，用力震荡离心管（溶液充分乳化，成乳白状，无分相现象），室温放置10min（由于氯仿沸点低、易挥发，振荡时离心管可能爆开，小心）；
3、4℃，13000r/min离心15min，取上层液相移入另一管（切忌吸动白色中间相）；
4、加入等体积异丙醇，轻轻颠倒离心管充分混匀液体，室温放置10min；
5、4℃，13000r/min离心15min，用枪小心吸去所有上清；
6、1ml 75%乙醇洗一遍，4℃，8000r/min离心10min，用枪小心吸去所有上清，在超净台中干燥5min；
7、加入适量DEPC处理水。；
8、建议立即做RT。若要保存，可在上一步加入乙醇后冻存于-70℃，可保存一年；若加入DEPC水后则只能在-20℃保存1个月左右。
三、Trizol法提取法
Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌，样品量从几十毫克至几克。
1、取鸡胚尿囊液，加入5-10倍体积Trizol液，混匀；
2、室温放置5分钟，然后以每1ml Trizol液加入0.2ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒；
3、取上层水相于一新的离心管，按每ml Trizol液加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇，室温放置10分钟，12000g离心10分钟；
4、弃去上清液，按每ml Trizol液加入至少1ml的比例加入75%乙醇，混匀，4℃下 7500g离心5分钟；
5、重复第4步；
6、小心弃去上清液，然后室温干燥5-10分钟，注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度；
7、然后将RNA溶于水中，放置10分钟。
