病毒RNA纯化试剂盒实验案例

一、实验目的：

检测Simgen 病毒RNA纯化试剂盒分离纯化病毒RNA的效果。

二、实验步骤：

1.使用Simgen 病毒RNA纯化试剂盒从HCV血清中提取RNA（具体实验步骤详见说明书），将提取的RNA进行反转录及PCR扩增。

2.使用传统Trizol法从HCV血清中提取RNA，将提取的RNA进行反转录及PCR扩增。

三、实验样本：

100μl，5×10⁵ copies/ml的HCV血清。

四、实验结果：

曲线1：用Simgen病毒RNA纯化试剂盒从100 μl，5×10⁵ copies/ml的HCV血清中提取的RNA作为模板检测HCV所获得的扩增曲线（RT-PCR一步法，50 μl扩增体系中加入25 μl纯化的RNA）
曲线2：用传统的Trizol法（添加糖原助沉）从100 μl同一5×10⁵ copies/ml的HCV血清中提取的RNA作为模板检测HCV所获得的扩增曲线（RT-PCR一步法，50 μl扩增体系中加入全部纯化的RNA）

五、实验结论：

1.根据上图可知，使用Simgen 病毒RNA纯化试剂盒从HCV血清中提取RNA，经反转录后成功扩增出曲线，证明病毒总RNA试剂盒提取的RNA能够满足后续实验需求。

2.根据上图可知，使用Simgen 病毒RNA纯化试剂盒从HCV血清中提取RNA，经反转录后扩增的曲线，较使用传统Trizol法，PCR灵敏度更高。