Simgen植物组织DNA试剂盒破坏性测试结果

作者:新景实验室
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小新在做实验的时候突然被BOSS叫了出来(不用说,肯定又是倒苦水),说是销售部门又接到投诉了,某位顾客投诉我们的植物DNA试剂盒提取效率低。这次小新没有拿着盒子就直接去做实验,毕竟我都不知道问题出在哪里,总要去问一下吧。不问还好,一问简直差点被气吐血!!!作为一个有尊严的试剂盒,它都是有说明书的!!!说明书上写的内容明明是:300-500mg 组织研磨,称取50-100 mg研称粉末状的组织提取DNA,而这位客户在没有仔细阅读说明书的情况下,给出了这样的答复: “你不是说用300-500 mg组织提取DNA吗,我大概取了1/3离心管的植物组织样提取的DNA,结果效率非常低好不好!!!”一句话气得小新当场想把说明书撕了!但是本着顾客就是上帝的原则,我还是决定模拟客户的实验,做一下对照,等我拿到数据之后再跟你叫板

小新去楼管阿姨种的蔬菜上扯了两片辣椒叶,称了1g叶片。将1g的植物组织用液氮研磨成粉末状,分成两管,编号为1100mg,编号为2500mg。按照植物组织DNA提取说明书进行操作,最终用100μl Buffer TE洗脱。测量OD值,并取8μl进行电泳检测。不一会儿实验结果就出来了。(小新的猜测是编号为2的那管根本提取不到DNA,毕竟整个体系被破坏的太厉害,一般的盒子提取DNA的效率会非常低,有些甚至一点都提不到┑( ̄Д  ̄)

两个样本最终测得的OD


以及电泳图如下:


出乎意料,当样本量增加到500mg时,simgen的植物试剂盒也还是可以提取到DNA的,不过很遗憾,与100mg 的样本比较,DNA浓度不是增加了5倍,而是浓度更低了。为什么呢?DNA结合到纯化柱上需要一定的缓冲体系,当加入过多的样本时,会破坏原有的缓冲体系,导致纯化柱结合DNA的效率降低。因此我们建议用户,还是应当在说明书指导的范围内选择组织用量,如果超过说明书指导的使用范围,结果自然会不理想(不要瞎瘠薄做实验,我们还是可以作朋友是的)

当然啦,想要得到较多的DNA,可以将植物组织样本在液氮条件下研磨研磨得更充分(当组织研磨至面粉状时,大部分植物细胞的细胞壁都已经被打破),或者加入Buffer TE 后延长静置时间(比如延长至10-20分钟,DNA会更充分地溶解),可以更有效地提高DNA的获取量。

好啦小新不废话继续去做实验啦,我们下期再会么么哒(づ ̄ 3)

 

 

                                                       新景生物实验室