1、细胞悬浮反复冻融3次，3000rpm离心15min，取上清液500ul。
2、 500ul样品中加入3ul1.5MTris-Cl，20ul 0.5mol/mlEDTA和5.2u1 Np-40。
3、加入终浓度为50ug/ml蛋白酶k 13.125ul（存储浓度为20mg/ml）55℃作用2h。
4、等体积的酚氯仿抽提；等体积的氯仿2次，12000rpm 5min。
5、将上清移入新的EP管中，加1/10体积的NaAC和2体积的无水乙醇，-70℃作用30min后，12000rpm10min.
6、70%无水乙醇洗涤两次，晒干后用30ulTE溶解，-20℃保存备用。
7、再加终浓度为50ng/mLRnase,37℃作用1h。