可能的原因:
1、制作的凝胶从加样孔至DNA泳动方向呈现为一个降低的斜面,DNA在泳动的过程中大量地流失到电泳缓冲液中。制作琼脂糖凝胶时应注意放平制胶槽,并加入足够量的凝胶液。
2、凝胶没有完全被溶解,DNA仍保留在未溶解的凝胶中。在50°C溶胶时每隔2-3分钟请将离心管漩涡振荡数秒以帮助凝胶彻底溶解。
3、在凝胶溶解后的溶液中加入异丙醇出现雾状沉淀。出现该种现象主要是因为凝胶没有被彻底溶解,此时应注意不要省略后续的Bufffer G的洗涤步骤,并且加入BufferG到纯化柱中后室温静置1分钟,以增强对未溶解的凝胶的洗涤效果。