RNA降解
1、新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),不可直接匀浆,应在加入部分Buffer TL的条件下用研磨棒将组织研成匀浆状。
2、样本贮存:组织样本取材后应立即置于液氮中速冻,然后移至﹣70℃冰箱保存;细胞样本应在收集后直接加入1 ml Buffer TL,然后移至﹣70℃冰箱保存。如果不能立即放入﹣70℃冰箱保存,可选购RNA样本保存液(Simgen Cat. No. 4007020/4007100)。
3、外源RNA酶的污染:试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统。参考第2页“防止RNA酶污染的注意事项”改善实验条件和实验环境,并确保在RNA提取专用实验室提取RNA。
4、当使用RNA样本保存液时,应注意以下事项:
A. 只选用新鲜的、未反复冻融的样本加入RNA样本保存液保存;
B. 样本中加入RNA样本保存液后不要长时间室温存放。RNA样本保存液保存样本是有时间期限的,一般在37℃下只能保存1天,在15-20℃下可延长至1周,在2-8℃可延长至4周,若长期保存,应保存在﹣20℃以下。
5、电泳检测时,推荐使用甲醛变性胶电泳(参考分子克隆第三版第540页)。如果没有甲醛变性胶电泳的条件,关注simgenbio微信公众号查询《如何做好RNA电泳实验》文章,获取相关实验技巧。