可能的原因:
1、样本保存不当,导致样本中的DNA降解。比如在2~8 ℃冰箱放置超过两个星期的全血样本即开始出现溶血现象,如果需要继续使用血样,则应转移到-20 ℃或-70 ℃冻存。否则获得的DNA将开始出现凋亡细胞的DNA带型,并且此时全血中的DNA随着时间的延长会持续分解,直至分离不到电泳可见的DNA。对于含水量高的组织样本均应贮存于-20 ℃,推荐贮存于-70 ℃。
2、使用了过多的起始样本,过柱时堵塞纯化柱,影响洗脱效率;使用了过少的起始样本。请根据第3页“起始样本”内容决定起始样本的用量。
3、Buffer WA或Buffer WB中未加入无水乙醇。应按比例补加无水乙醇,如果是错误地加入了其他试剂,请向我公司技术部寻求帮助。
4、错误地使用了Buffer WA和Buffer WB的洗涤顺序。确保按正确的顺序洗涤纯化柱。
5、DNA的洗脱效率差。参考第3页柱纯化技术中的第4点“洗脱DNA“内容,优化DNA的洗脱方案。