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质粒DNA中含有RNA污染
可能的原因：
1) Buffer I中所含的RNase A活性降低。如果加入RNase A的Buffer I在2~8℃保存的时间超过6个月的，应再补充RNase A至终浓度100 μg/ml。
2) 菌液量过多或者细菌本身特性导致RNA含量过多，不能完全被RNase A降解。可以增加Buffer I中RNase A的浓度。
3) 冬季环境温度低，会导致RNase A活性降低，可在中和步骤后将中和产物放置到37℃水浴5-15分钟后再进入下一步操作，以提高RNase A的消化效率。