Simgen SYBR Green PCR Mix的选择

近来有用户反映Simgen的2×SYBR Green PCR Mix（7106100）产品做PCR检测，与某公司的SYBR Green Mix相比较，发现有CT值有增大的现象，这是为什么呢？

小编经过深入研究，发现当选用 2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ配合用户的引物PCR检测时，CT值就与某公司的SYBR Green Mix几乎一致了。原来2×SYBR Green PCR Mix（7106100）是追求高特异性的产品；而2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ则是追求高灵敏度的产品--但是它对于引物的要求会比较高，如果引物设计得不好，在PCR的过程中，模板起始浓度较低时很容易出现非特异扩增，下面就让小编给大家介绍一下这两款产品的优点及不足：

下面是两款产品实例测试： 

PCR体系配置

2×SYBR Green PCR Mix的标准曲线 
 
 从上图所述，2×SYBR Green PCR Mix（7106100）的相关系数高达0.999，而且重复性高。

2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ（7107100）的标准曲线

从上图所述，2×SYBR Green PCR MixⅡ在高浓度模板时，相关系数高达0.999，重复性高；但是引物设计不完美时，一旦有低模板浓度，就会出现非特异扩增，从而降低相关系数。

CT值表

从CT值表格及融解曲线看，可看出2×SYBR Green PCR MixⅡ在灵敏度上比2×SYBR Green PCR Mix（7106100）会高出0.5-1个CT值左右，但是在低浓度模板时（10^-7），2×SYBR Green PCR MixⅡ的CT值出现异常，这是因为在引物设计的不是很好时，2×SYBR Green PCR MixⅡ在低浓度模板时易出现非特异扩增。  

综上所述，2×SYBR Green PCR Mix（7106100）的特异性比2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ高，但是在灵敏度上不如2×SYBR Green PCR MixⅡ。所以倘若追求高特异性，小编推荐使用2×SYBR Green PCR Mix（7106100），如果追求灵敏度，还是推荐使用2×SYBR Green PCR MixⅡ。

新景生物实验室