实验目的：
从种子中提取DNA。
实验材料：黄豆、面粉、研钵、植物DNA试剂盒（Simgen，Cat.No.3201050）
实验方法：
本次实验采用Simgen的植物DNA试剂盒方法来提取种子中的DNA，步骤如下：
1. a.黄豆：
称取黄豆1颗（约200mg），放入研钵中研磨至粉末状，加入1.5 ml 65℃预热的Buffer PL，继续研磨，分别吸取600 μl溶解物加入2个1.5 ml 离心管（相当于每次从约100mg 黄豆中提取DNA）；
b.面粉（小麦粉）：
2个1.5 ml 离心管中分别称取100mg和200mg面粉，加入500ml 65℃预热的Buffer PL，旋涡震荡至充分溶解；
2. 65℃水浴10分钟，水浴期间每隔2~3分钟翻转离心管数次以帮助DNA的释放；
3. 加入350 μl Buffer K，盖上管盖，用力摇晃15秒，旋涡振荡30秒。13000 rpm离心5分钟；
4．将离心上清液倒入核酸纯化柱中，离心去滤液；
5. 依次用500 μl Buffer WA和600 μl Buffer WB过柱洗涤；
6. 最高速离心，去除纯化柱上残留的乙醇；
7. 将核酸纯化柱置于一个洁净的1.5ml离心管中，用60 μl 65℃预热的Buffer TE 洗脱DNA；
8. 在微量紫外分光光度计上测量DNA的浓度；
9. 琼脂糖凝胶电泳。
实验结果：
1. 在微量紫外分光光度计上用Buffer TE调零，测量洗脱下来的DNA，结果如下：
2. 在0.6%的琼脂糖凝胶上，加入8μl提取到的DNA，电泳30 分钟，结果如下：
讨论与分析：
1．用Simgen植物DNA试剂盒能提取到黄豆、面粉（小麦粉）的DNA，说明在干燥的种子中，DNA保存得比较完整。
2．面粉DNA的电泳条带显示有明显的拖尾现象，产生了类似凋亡细胞的DNA带型。推测是由于种子被磨碎后，DNA更容易失去组蛋白的保护，从而形成凋亡细胞的DNA带型。
3．由于植物种子中DNA含量较低，可适度提高样本的用量（以面粉DNA提取为例），但样本用量不应大于200mg。以200 mg面粉提取DNA为例，样本加入裂解液（Buffer PL）水浴后变得非常粘稠，操作变得困难，且DNA回收量与100mg相比也没有成倍地增长。
4．植物种子通常会含有大量的蛋白、油脂、多糖（淀粉为主），Simgen植物DNA试剂盒在提取过程中能很好地抵御这些干扰。
Simgen实验室
