病毒核酸纯化试剂盒相关实验案例

作者:新景实验室
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一、实验目的:

比较simgen病毒核酸纯化试剂盒和传统煮沸法提取核酸的效果

二、实验方法:

1.采用Simgen病毒核酸纯化试剂盒提取HBV DNA(详见产品说明书);

2.采用传统煮沸法提取HBV DNA

3.将所获核酸进行扩增

三、实验样本:

血清

四、实验结果:

将所得的DNA作为模板扩增,得:

                                                                                           

曲线1:传统煮沸法提取的血清中HBV DNA作为模板的扩增曲线(50 μl扩增体系中加入5 μl分离的DNA)。
曲线2Simgen病毒核酸纯化试剂盒分离纯化的同一血清(200 μl)中HBV DNA作为模板的扩增曲线(50 μl扩增体系中加入5 μl纯化的DNA)。
曲线3:提高Simgen病毒核酸纯化试剂盒分离纯化的HBV DNA作为模板的使用量的扩增曲线50 μl扩增体系中加入25 μl纯化的DNA)。

五、实验结论:

1.根据曲线1和曲线2分析,Simgen病毒核酸纯化试剂盒所提取的HBV DNA的浓度较传统煮沸法更高,因此检测灵敏度也更高。

2.根据曲线2和曲线3分析,增加HBV DNA模板使用量,CT值减小,未见明显的抑制效果,说明采用Simgen病毒核酸纯化试剂盒提取的HBV DNA纯度较高,不含杂质和抑制物。